分享一篇关于小鼠乳腺癌博业体育app下载安装手机版 的培养步骤

　　今天为大家分享一篇关于小鼠乳腺癌博业体育app下载安装手机版 的培养步骤，话不多说下面一起来了解一下吧。
 

　　一.培养基及培养冻存条件准备：
 

　　1)准备培养基，90%;上等胎牛血清，10%。
 

　　2)培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
 

　　3)冻存液：90%培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 

　　二.博业体育app下载安装手机版 处理：
 

　　1)复苏博业体育app下载安装手机版 ：将含有1mL博业体育app下载安装手机版 悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有博业体育app下载安装手机版 悬液加入培养瓶中培养过夜(或将博业体育app下载安装手机版 悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜)。**天换液并检查博业体育app下载安装手机版 密度。
 

　　2)博业体育app下载安装手机版 传代：小鼠乳腺癌博业体育app下载安装手机版 如果博业体育app下载安装手机版 密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 

　　对于贴壁博业体育app下载安装手机版 ，传代可参考以下方法：
 

　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗博业体育app下载安装手机版 1-2次。
 

　　2.加2ml消化液于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察博业体育app下载安装手机版 消化情况，若博业体育app下载安装手机版 大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
 

　　3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
 

　　4.将博业体育app下载安装手机版 悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

　　3)博业体育app下载安装手机版 冻存：小鼠乳腺癌博业体育app下载安装手机版 待博业体育app下载安装手机版 生长状态良好时，可进行博业体育app下载安装手机版 冻存。贴壁博业体育app下载安装手机版 冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，博业体育app下载安装手机版 变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。